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微流控單細(xì)胞包封系統(tǒng)
點擊次數(shù):884 更新時間:2022-12-07
 

微液滴的單細(xì)胞包封是采用微流控系統(tǒng)生成微液滴進行單細(xì)胞包封的技術(shù),采用壓力控制器驅(qū)動的微流控裝置可生產(chǎn)皮升級大小的液滴,可在單細(xì)胞水平上進行Hela等細(xì)胞的包封及進一步的分析。Elveflow 提供微流控單液滴包封的全套儀器設(shè)備及相關(guān)的用戶指導(dǎo)手冊,用于微液滴的單細(xì)胞包封及單細(xì)胞測序。

微流控單細(xì)胞包封的應(yīng)用包括:

腫瘤學(xué)(洞察小細(xì)胞亞群攜帶的突變)

免疫學(xué)(區(qū)分不同的免疫細(xì)胞群或表征免疫細(xì)胞群)

神經(jīng)學(xué)(獲取詳細(xì)的單細(xì)胞圖譜,以了解和識別大腦中不同類型的神經(jīng)元及其連接分子)

發(fā)育生物學(xué)(逐個細(xì)胞繪制胚胎的整個發(fā)育過程)

單細(xì)胞組學(xué)(揭示組織樣本的細(xì)胞異質(zhì)性)

Elveflow 采用微液滴進行單細(xì)胞包封的儀器配置如下:

  1. OB1 壓力控制器,至少有兩個      0–2000 mbar 通道

  2. 1 xMFS2 流量傳感器,0.4–7 μL/min,用于油相溶液

  3. 1 Xmfs3 流量傳感器      4.2–80 μL/min,用于細(xì)胞懸液

  4. 1 x 套件魯爾鎖啟動連接件

  5. 2 x 15 mL 儲液管

  6. 具有疏水通道的微流控芯片

  7. 用于觀察的顯微鏡

  8. 用于成像的攝像頭(可選)

  9. HF5-7500 +      1 % FluoSurf表面活性劑

  10. Aquapel用于疏水處理(可選)

微流控芯片是微液滴單細(xì)胞包封的關(guān)鍵部件,可采用流動聚焦的微流控微液滴生成芯片,材質(zhì)是PDMS ,微通道可以用Aquapel進行處理,形成疏水性的微流體通道。

Fluidic 947 微液滴生成芯片,可獲得10-30μm的液滴。

Fludic 440 微液滴生成芯片,可獲得50-80μm的液滴

單細(xì)胞包封微流控芯片,生成20-50 μm的液滴。

這些芯片有2個入口,1個出口,入口分別是細(xì)胞懸浮液和油相,可實現(xiàn)單細(xì)胞包封。

如果想進行單細(xì)胞包封后測序,可采用4個入口和1個出口的微流控芯片,4個入口分別用于細(xì)胞懸浮液,Barcoded 水凝膠珠,裂解緩沖液和油相。

例如采用細(xì)胞溶液,13.57X105細(xì)胞/ml, 生微液滴平均直徑為51.2μmCV=2.4%)。

參考文獻:Collins. D et al (2015), “The Poisson distribution and beyond: methods for microfluidic droplet production and single cell encapsulation". Lab on a Chip, 15, 3439-3459. 



 
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